泡菜廢水處理-宜興綠島污水處理設備廠(chǎng)

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泡菜廢水處理

高鹽廢水是指鹽度（以ＮａＣｌ計）至少為10％（質(zhì)量分數）的廢水，主要包括含鹽工業(yè)廢水、含鹽生活污水和其他含鹽廢水。四川泡菜是具有地方特色的發(fā)酵蔬菜制品，泡制泡菜后的高鹽廢水通常鹽度達到5.0％左右，其中含有大量的嗜鹽菌。

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高鹽廢水是指鹽度（以ＮａＣｌ計）至少為10％（質(zhì)量分數）的廢水，主要包括含鹽工業(yè)廢水、含鹽生活污水和其他含鹽廢水。四川泡菜是具有地方特色的發(fā)酵蔬菜制品，泡制泡菜后的高鹽廢水通常鹽度達到5.0％左右，其中含有大量的嗜鹽菌。由于嗜鹽菌具有特殊的結構和理化性質(zhì)，能抵抗高鹽濃度環(huán)境脅迫，不易污染，可減少發(fā)酵工藝，降低成本，因此常用于發(fā)酵生產(chǎn)。嗜鹽菌種類(lèi)繁多，它們的分類(lèi)主要依據三個(gè)方面：表型特征、化學(xué)分類(lèi)數據和分子生物學(xué)數據。

嗜鹽菌的分離和菌體的培養　

　　將冷凍保藏的高鹽廢水置于培養箱中解凍活化，取0.1ｍＬ到ＥＰ管中，再加入0.9ｍＬ已滅菌的蒸餾水，用漩渦振蕩器混合均勻。從中取200μＬ均勻涂布于ＬＢ培養基（其中ＮａＣｌ濃度為１５％）上，37℃倒置培養48ｈ。從長(cháng)出的菌中挑選20株長(cháng)勢較好的菌株轉接到新的LB培養基上，并對每一株菌進(jìn)行編號。

再對每株菌進(jìn)行反復劃線(xiàn)，直到得到單菌落。后將分離得到的菌劃線(xiàn)于保藏管中保藏待用。配制液體ＬＢ培養基300ｍＬ，分別置于３個(gè)三角瓶中，選取３株長(cháng)勢較好，差異較大的菌分別接種于３個(gè)三角瓶中，并作好標記，于37℃，200ｒ／ｍｉｎ搖床培養,17ｈ。

16ＳｒＤＮＡ序列及系統發(fā)育分析

基因組ＤＮＡ的提取和１６ＳｒＤＮＡ的擴增及序列分析參見(jiàn)Ｔｏｒｕ　Ｓｈｉｇｅｍａｔｓｕ等方法。引物采用細菌１６ＳｒＤＮＡ　ＰＣＲ擴增通用引物Ｅｕ２７Ｆ（５′ －ＡＧＡＧＴＴＴＧＡＴＣＣＴＧＧＣＴＣＡＧ－３′ ，１０ μ Ｍ）和原核微生物特異引物１４９０Ｒ（５′ －ＧＧＴＴＡＣＣＴＴＧＴ　ＴＡＣＧＡＣＴＴ－３′ ，１０ μ Ｍ）。ＰＣＲ擴增條件：９４℃ 變性１ｍｉｎ，５０℃ 退火１．５ｍｉｎ，７２℃ 延伸２ｍｉｎ，３０個(gè)循環(huán)。ＰＣＲ產(chǎn)物經(jīng) ｐＧＥＭ－Ｔ載體Ｔ－Ａ克隆入Ｅ．ｃｏｌｉ　ＤＨ　５α ，挑選陽(yáng)性菌落，提取重組質(zhì)粒。將質(zhì)粒送ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司進(jìn)行序列測定，并將測得的序列去載體后提交到ＮＣＢＩ進(jìn)行比對，將所測序結果與數據庫中已知序列在ＧｅｎＢａｎｋ數據庫中比對，獲得與實(shí)驗菌株相似的典型菌株１６ＳｒＤＮＡ序列，選取序列用Ｃｌｕｓｔａｌ　Ｘ和ＭＥＧＥ　４．０繪制系統發(fā)育樹(shù)，對所構建的系統發(fā)育樹(shù)評估。

三、結果

1.嗜鹽菌的分離結果

劃線(xiàn)分離后得到的單菌落和終分離得到的２０株單菌。由圖1，圖2可知，分離得到的這２０株單菌株有一定的耐鹽性，能在含鹽量為１５％的ＬＢ培養基上生長(cháng)；嗜鹽菌菌落部分為白色，部分為黃色，扁平，表面光滑，濕潤，直徑在１～２ｍｍ左右。挑選出差別較大菌株分別命名為ＭＳ１、ＭＳ２、ＭＳ３。